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漲知識~常見的熒光染料，收藏起來了！
免疫熒光技術(Immunofluorescence technique)，用熒光抗體示蹤或檢查相應抗原的方法稱熒光抗體法；用已知的熒光抗原標記物示蹤或檢查相應抗體的方法稱熒光抗原法；這兩種方法總稱免疫熒光技術，是標記免疫技術中發(fā)展最早的一種。
它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合，利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。
因為熒光色素不但能與抗體球蛋白結合，用于檢測或定位各種抗原，也可以與其他蛋白質結合，用于檢測或定位抗體，但是在實際工作中熒光抗原技術很少應用，所以人們習慣將免疫熒光技術又稱為熒光抗體技術，以熒光抗體方法較常用。
用免疫熒光技術顯示和檢查細胞或組織內抗原或半抗原物質等方法稱為免疫熒光細胞(或組織)化學技術。
熒光探針
熒光探針是指在紫外-可見-近紅外區(qū)有特征熒光，并且其熒光性質(激發(fā)和發(fā)射波長、強度、壽命、偏振等)可隨所處環(huán)境的性質，如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子。
與核酸(DNA或RNA)、蛋白質或其他大分子結構非共價相互作用而使一種或幾種熒光性質發(fā)生改變的小分子物質。可用于研究大分子物質的性質和行為。
目前常用的熒光探針有熒光素類探針、無機離子熒光探針、熒光量子點、分子信標等。熒光探針除應用于核酸和蛋白質的定量分析外，在核酸染色、DNA電泳、核酸分子雜交、定量PCR技術以及DNA測序上都有著廣泛的應用。我們以后主要討論熒光素類探針。
熒光標記的單克隆抗體技術為流式細胞儀在研究細胞膜和細胞內各種功能性抗原、腫瘤基因蛋白等領域擴展了無限的應用空間。熒光探針可以通過蛋白質交聯(lián)劑共價結合在單克隆抗體上。
免疫熒光標記最常用的染料有異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)、藻紅蛋白(PE)以及AlexaFluor系列染料等。
熒光染料在核酸檢測中的應用
核酸熒光染料對細胞核染色后定量測量細胞所發(fā)出的熒光強度，就可以確定細胞核中DNA、RNA的含量，并可以對細胞周期和細胞的增殖狀況進行分析。有多種熒光染料可以對細胞中的DNA或RNA染色，常用的DNA染料包括碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst 33342等，RNA染料有噻唑橙、吖啶橙等。
既然熒光染料有這么廣泛的應用，那或許會有小伙伴想要對自己想研究的對象進行熒光偶聯(lián)了吧？
熒光偶聯(lián)
比如Abbkine LinKine™偶聯(lián)標記試劑盒，我們可以在抗體、蛋白質、多肽或者其它生物分子上直接標記FITC、Cy3、AbFluor™熒光染料以滿足科研應用、藥物研發(fā)以及診斷試劑盒開發(fā)的需求。可對一抗進行直標，無需二抗，免去繁瑣的孵育和洗滌步驟，節(jié)省時間。
操作簡便，穩(wěn)定高效，標記后的抗體可以兼容ELISA、免疫組化、免疫熒光等各類免疫學應用。
AbFluor™熒光染料
AbFluor™是一系列高度水溶性熒光染料，具有不同熒光染料核心結構，覆蓋從UV到NIR的熒光光譜，相比于其它染料有許多新穎功能，并且是一種高亮度且耐光的熒光染料，是Cy3，Alexa Fluor，F(xiàn)ITC，TRITC，Dylight，IRDye的絕佳替代品，可直接用于偶聯(lián)實驗。
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